Официальные оппоненты: Холмухамедов Эхсон Лукманович, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории тканевой инженерии Ведущая организация – Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский кардиологический


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте файл и откройте на своем компьютере.
1 ЗАКЛЮЧЕНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО СОВЕТА Д 002.039.01 НА БАЗЕ ФЕДЕРАЛЬНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО БЮДЖЕТНОГО УЧРЕЖДЕНИЯ НАУКИ ИНСТИТУТА БИОХИМИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ ИМ. Н.М. ЭМАНУЭЛЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ПО ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА НАУК аттестационное дело № ______________________ 19 .0 4 .201 7 г., протокол № 6 О присуждении Подоплеловой Надежде Александровне , гражданке Российской Федерации, ученой степени кандидата биологических наук. Диссертация « Взаимод ействие факторов свертывания крови с субпопуляциями активированных тромбоцитов » по специальности 03.01.02 – биофизика принята к защите 15 февраля 2017 года, протокол № 4, диссертационным советом Д бюджетного учреждения науки Института биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук по адресу 119334, Российская Федерация, г. Москва, ул. Косыгина, д. 4; приказ Министерства образования и науки 105/нк от 11 апреля 2012 года. Соискатель – Подоплелова Надежда Александровна 8 года рождения, в 2010 году окончила Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вятский государственный университет» по специальности « биотехнология ». С 01 марта 201 1 года п о 201 4 года обучалась в очной аспирант уре Федерального государственно го бюджетно го учреждени я науки «Центр т еоретических проблем физико - химической по специальности 03.01.02 – биофизика . В настоящее время работает в должности научного сотрудника лаборатории клеточного гемостаза и тромбоза Национального научно - практического центра детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Министерства здравоохранения Российской Фед ерации . Диссертация выполнена в лаборатории молекулярных механизмов гемостаза Федерального государственного бюджетно го учреждения науки «Центр 2 т еоретических проблем физико - химической фармако логии» Российской академии наук . Научный руководитель – доктор физико - математических наук, Пантелеев Михаил Александрович , заведующий лабораторией молекулярных механизмов гемостаза Федерального государственного бюдж етного учреждения науки «Центр т еоретических проблем физико - химической фармакологии» Российской а кадемии наук. Официальные оппоненты: Холмухамедов Эхсон Лукманович , доктор биологич еских наук, в едущий научный сотрудник л аборатории тканевой инженерии Федерального государственного бюджетно го учреждени я науки Институт а теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук ; Литвинов Рустем Игоревич , доктор медицинских наук, профессор кафедры биохимии и биотехнологии Институт а фундаментальной медицины и биологии Федерально го государственно го автономно го обр азовательно го учреждени я высшего образования «Казанский (Приволжский) федеральный университет» дали положительные отзывы на диссертацию. Ведущая организация – Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский кардиологический научно - производственный комплекс» Министерства здравоохранения Российской Федерации (г. Москва) в своем положительном заключении , подписанном доктором биоло гических наук Бурячковской Люд милой Ивановной, ведущим научным сотрудником лаборатории клеточной адг езии и утвержденн о м заместителем генерального директора по научной работе, директором И нститута экспериментальной кардиологии, до кторо м медицинских наук, профессором Терещенко Сергеем Николаевичем , о тмечает , что диссертация является актуальной и представляет несомненный интерес для понимания механизмов работы мембранно - зависимых реакций свертывания и для дальнейшей разработки новых лекарственных средств и методов диагностики. Научная новизна диссертационной работы заключается в том, что впервые по казано, что связанные с мембраной фактор ы Х и Ха состоя т из двух фракций одна из которых связана обратимо, другая – необратимо. В 3 экспериментах в проточных камерах автором показано, что подобное закрепление факторов на мембране тромбоцитов может препятство вать их вымыванию из тромбоцитарного тромба в условиях потока. Также автором показано, что факторы свертывания неравномерно распределены на мембранах фосфатидилсерин - положительных тромбоцитов. Наблюдается регион, в котором локальная концентрация факторов в несколько раз выше, чем на остальной мембране тромбоцита. При этом напрямую показано, что такая локализация факторов может приводить к ускорению мембранно - зависимых реакций сверт ывания до 50 раз. Практическая значимость результат ов диссертационной работы состоит в том, что получены важные данные, позволяющие лучше разобраться в механизмах мембранно - зависимых реакций свертывания крови. В частности , объясняются механизмы предотвращ ающие вымывание факторов из тромбоцитарных тромбов потоком, а также механизмы ускорения мембранно - зависимых реакций. В заключение отмечено, диссертация Н.А. Подоплеловой представляет собой законченную научно - квалификационную работу и удовлетворяет требованиям, установленным пунктами 9 – 14 «Положения о присуждении ученых степеней», утвержденного Постановлением Правительства РФ № 842 от 24 сентября 2013 года, с изменениями Постановления Правительства РФ № 335 от 21 апреля 2016 года, в редакции Постановления Правительства РФ № 748 от 02 августа 2016 года, а ее автор заслуживает присвоения искомой ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.02 – биофизика . Соискатель имеет 16 научных работ, все по теме диссертации, из них 7 статей, опубликованных в рецензируемых российских и зарубежных научных периодических изданиях, входящих в перечень В АК , и тезисы 9 докладов на российских и международных конференциях. Наиболее значимые научные работы по теме диссертации: 1. Podoplelova, N.A concentrated in their cap structures to promote clotting / Podopl elova, N.A., Sveshnikova, A.N ., Kotova, Y.N ., Eckly, A ., Receveur, N ., Nechipurenko, 4 D.Y ., Obydennyi, S.I ., Kireev, I.I ., Gachet, C ., Ataullakhanov, F.I ., Mangin, P.H ., Panteleev, M. A . // Blood. – 2016. – Vol. 128. – № 13. – P. 1745 - 175 5 2. Подоплелова Н.А. Регуляция мембранно - зависимых реакция свертывания крови / Подоплелова Н.А., Котова Я.Н., Липец Е.Н., Атауллаханов Ф.И., Пантелеев М. А. // Успехи физиологических наук. – 2015. – Т. 46. – №4. – С. 3 - 14. 3. Zakharova - associated activation and secretion - mediated inhibition of coagulation factor XII. / Zakharova N.V., Artemenko E.O., Podoplelova N.A., Sveshnikova A.N., Demina I.A., Ataullakhanov F.I., Panteleev M.A. // PLoS One – 2015. – Vol.10. – №2, – P. e0116665 На автореферат поступило 4 положительных отзыва : 1) отзыв д.б.н., профессора Муриной Марины Алексеевны , главного научного сотрудника лаборатории физико - химических методов исследования и анализа Федерального государственного бюджетно го учреждения «Федеральный научно - клинический центр физико - химической медицины Федерального медико - биологического агенства» содержит замечание о том, что в автореферате имеются технические погрешности, затрудняющие чтение, например, сокращение «ФХ» обознач ает и фосфатидилхолин, и фактор Х; 2) отзыв д.м.н. , профессор а Васильева Сергея Александровича , ведущего научного сотрудник а НКО ХТ с ДС, Федерального государственного бюджетного учреждения «Гем атологический научный центр» Министерства здравоохранения Рос сийской Федерации без замечаний; 3) отзыв к. б .н. Животовой Веры Анатольевны , научного сотрудника группы разработки новых методов выявления генетических полиморфизмов ФБУН «Центральный научно - исследовательский институт Эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека без замечаний; 4) отзыв к.б.н. Д а шкевич Натальи Михайловны , ведущего научного сотрудника научного отдела ООО «Гемакор Лабс» без замечаний. В отзывах отмечена актуальность и научная новизна диссертационной работы. Сильной стороной данного исследования является широкий круг использованных м етодов. В работе рассмотрены как фундаментальные вопросы мембранно - зависимых реакций свертывания крови, так и возможность пра ктического 5 применения полученных результатов; а втор достаточно корректно использует известные научные биофизические и биохимические методы для обо снования полученных результатов и выводов ; опубликованные статьи достаточно полно отражают содержание работы, а также положения и результаты, выносимые на защиту. Приведенные в автореферате результаты и выводы обоснованы и достоверны. Выбор официальных оппонентов и ведущей организации обосновывается тем , что оппоненты и сотрудники ведущей организации являются признанными специалистами в областях науки, касающихся биофизики, свертывания крови , мембранно - зависимых реакций , имеют высоко цитируе мые публикации в данных сферах исследований, и способны о ценить научную и практическую значимость диссертации. Оппонент – д.б.н., Холмухамедов Э.Л. является специалистом в области биофизики мембранно - зависимых реакций. Оппонент – д.м.н., Литвинов Р.И. имеет огромный опыт преподавательской и научно - практической работы и является ведущим специалистом в области свертывания крови . Ведущая организация – Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский кардиологический научно - производственный комплекс» Министерства здравоохранения Российской Федерации является одним из ведущих институтов , в котором пров одятся фундаментал ьны е и прикладны е научны е исследовани я в области гематологии и свертывания крови. Диссертационный совет отмечает, что на основании выполн енных соискателем исследований: разработана м етодология исследования взаимодействия и пространственного распределения факторов свертывания с субпопуляциями активированных тромбоцитов; предложен ы оригинальн ые научн ые суждения , согласно котор ым мультимеризация факторов свертывания Х и Ха при их связывании с фосфолипидной мембраной препятствует их вымыванию из тромбоцитарног о тромба в услов иях потока , благодаря тому, что мультимеры более п лотно связ аны с мембранами по сравнению с мономер ами ; 6 доказан а двухступенчатая диссоциация факторов Х и Ха с мембраны активированных тромбоцитов, обусловленная м у льтимеризацией факторов . Теоретическая значимость исследования обоснована тем, что: доказаны положения о взаимодействии факторов плазменного звена с мембраной тромбоцитов , вносящие вкл ад в понимание механизмов протекания мембранно - зависимых реакций свертывания крови ; применительно к проблематике диссертации результативно (эффективно, то есть с получением обладающих новизной результатов) использован комплекс существующих базовых методов исследования, таких как проточная цитометрия, поверхностный плазмонный резонанс, а также конфокал ьная и электронная мик роскопия ; изложены результаты , свидетельствующие о различиях в механизме закрепления на мембране факторов Х и Ха: для фактора Х – закрепление на фосфолипидной мембране происходит за счет его стабилизации, а для фактора Ха основную роль играет мультимеризация; раскрыт ы механизмы , препятствующие вымыванию факторов свертывания из тромбов в условиях потока , которые включают многостадийно е связывани е факторов свертывания с мембраной активированных тромбоцитов , неравномерном распределени и на ней, образование области повышен ной локальной концентрации факторов , приводящей к значительному, до 50 раз, увеличению скорости мембранных реакций ; изучен ы процессы ассоциации и диссоциации факторов Х и Ха с фосфолипидными везикулами и активированными тромбоцитами , измерены константы скорости этих реакций, определены константы равновесия и количество сайтов связывания; Значение полученных соискателем результатов исследования для практики подтверждается тем, что: разработаны научные основы взаимодействия факторов плазменного звена свертывания с тромбоцитами в процессе росте тромба ; 7 определена структура участков мембраны прокоагулянтных тромбцитов , в которых концентрируются фак торы свертывания и которые характеризуются большим количеством складок мембран и органелл ; представлены результаты, которые могут быть использованы для создания новых клинических методов диагностики нарушений свертывания крови. Оценка достоверности результатов выявила: научные положения, выводы и результаты, сформули рованные в диссертации, обоснованы экспериментальными данными , достоверны и получили признание в научной литературе и на различных конференциях ; экспериментальная работа выполнена на высоком научном уровне , результаты получены на сертифицированном оборудов ании с применением современных биофизических и биохимических методов исследования, стандартных методик обработки результатов ; калибровки обоснованы; п оказана воспроизводимость результатов ис следования в различных условиях; теория построена на известных, проверяемых данных по механизмам взаимодействия белковых факторов свертывания с фосфолипидными клеточными мембранами и опубликованны х экспериментальны х данны х по теме диссертации; идея базируется на анализе литературных данных в об ласти изучения биофизических механизмов мембранно - зависимых реакций свертывания крови; использован ы авторски е данны е и данны е , полученны е ранее и опубликованны е в литературе ; установлено , что полученные ав тором результаты согласуются с ранее опубликованными данными ведущих российских и зарубежных специалистов и не противоречат существующим представлениям о механизмах мембранно - зависимых реакций свертывания крови; использованы современные методики сбора и об работки информации с обоснованием выбора объект а и методов исследования. Личный вклад соискателя состоит в анализе литературных данных, планировании и проведении экспериментов, обработке и интерпретации полученных данных, представлении результатов на российских и международных конференциях, а также в подготовке научных публикаций по теме работы. Все

Приложенные файлы

  • pdf 26750840
    Размер файла: 552 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий