Официальные оппоненты: Холмухамедов Эхсон Лукманович, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории тканевой инженерии Ведущая организация – Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский кардиологический


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте его и откройте на своем компьютере.
1


ЗАКЛЮЧЕНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО СОВЕТА Д 002.039.01 НА БАЗЕ
ФЕДЕРАЛЬНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО БЮДЖЕТНОГО УЧРЕЖДЕНИЯ
НАУКИ ИНСТИТУТА БИОХИМИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ ИМ. Н.М. ЭМАНУЭЛЯ
РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ПО ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ
УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА НАУК

аттестационное дело № ______________________

19
.0
4
.201
7

г.,
протокол



6


О присуждении
Подоплеловой Надежде Александровне
, гражданке Российской
Федерации, ученой степени кандидата
биологических

наук.

Диссертация
«
Взаимод
ействие факторов свертывания крови с субпопуляциями
активированных тромбоцитов
» по специальности 03.01.02



биофизика

принята к
защите
15 февраля 2017

года, протокол


4, диссертационным советом Д
бюджетного учреждения
науки Института биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской
академии наук по адресу 119334, Российская Федерация, г. Москва, ул. Косыгина,
д. 4; приказ Министерства образования и науки 105/нк от 11 апреля 2012 года.

Соискатель



Подоплелова Надежда Александровна
8 года рождения, в 2010

году окончила
Федеральное государственное бюджетное образовательное
учреждение

высшего образования «Вятский государственный университет»

по
специальности «
биотехнология
».

С
01 марта
201
1

года п
о
201
4

года
обучалась в

очной
аспирант
уре

Федерального

государственно
го

бюджетно
го

учреждени
я

науки «Центр
т
еоретических проблем физико
-
химической
по специальности 03.01.02



биофизика
. В настоящее время работает в должности
научного сотрудника

лаборатории
клеточного гемостаза и тромбоза

Национального научно
-
практического центра детской
гематологии, онкологии и иммунологии им.
Дмитрия Рогачева

Министерства здравоохранения Российской Фед
ерации
.

Диссертация выполнена

в лаборатории молекулярных механизмов гемостаза
Федерального

государственного

бюджетно
го учреждения

науки «Центр
2


т
еоретических проблем физико
-
химической фармако
логии» Российской академии
наук
.

Научный руководитель



доктор физико
-
математических наук,
Пантелеев
Михаил Александрович
,
заведующий лабораторией молекулярных механизмов
гемостаза Федерального государственного бюдж
етного учреждения науки «Центр
т
еоретических проблем физико
-
химической фармакологии» Российской а
кадемии
наук.

Официальные оппоненты:

Холмухамедов Эхсон Лукманович
,
доктор биологич
еских наук, в
едущий
научный сотрудник

л
аборатории тканевой инженерии
Федерального
государственного

бюджетно
го

учреждени
я

науки Институт
а

теоретической и
экспериментальной биофизики Российской академии наук
;

Литвинов Рустем Игоревич
,
доктор медицинских наук, профессор

кафедры
биохимии и биотехнологии

Институт
а

фундаментальной медицины и биологии
Федерально
го

государственно
го

автономно
го

обр
азовательно
го

учреждени
я

высшего образования «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

дали положительные отзывы на диссертацию.

Ведущая организация



Федеральное государственное бюджетное учреждение
«Российский кардиологический
научно
-
производственный комплекс»
Министерства здравоохранения Российской Федерации

(г. Москва) в своем
положительном заключении
,

подписанном
доктором биоло
гических наук
Бурячковской Люд
милой Ивановной,
ведущим научным сотрудником
лаборатории клеточной адг
езии
и утвержденн
о
м заместителем генерального
директора по

научной работе, директором
И
нститута экспериментальной
кардиологии, до
кторо
м медицинских наук, профессором
Терещенко

Сергеем
Николаевичем
,
о
тмечает
, что
диссертация

является
актуальной и
представляет

несомненный интерес для понимания механизмов работы мембранно
-
зависимых
реакций свертывания и для дальнейшей разработки новых лекарственных средств
и методов диагностики.
Научная новизна диссертационной работы заключается в
том, что впервые

по
казано, что

связанные с мембраной

фактор
ы Х и Ха состоя
т из
двух фракций одна из которых связана обратимо, другая


необратимо. В
3


экспериментах в проточных камерах автором показано, что подобное закрепление
факторов на мембране тромбоцитов может препятство
вать их вымыванию из
тромбоцитарного тромба в условиях потока.
Также автором показано,
что
факторы свертывания неравномерно распределены на мембранах
фосфатидилсерин
-
положительных

тромбоцитов. Наблюдается регион, в котором
локальная концентрация факторов в несколько раз выше, чем на остальной
мембране тромбоцита. При этом напрямую показано, что такая локализация
факторов может приводить к ускорению мембранно
-
зависимых реакций
сверт
ывания до 50 раз.


Практическая значимость

результат
ов

диссертационной работы состоит

в том,
что

получены важные данные, позволяющие лучше разобраться в механизмах
мембранно
-
зависимых реакций свертывания крови. В частности
,

объясняются
механизмы предотвращ
ающие вымывание факторов из

тромбоцитарных тромбов

потоком, а также механизмы ускорения мембранно
-
зависимых реакций.

В заключение отмечено,
диссертация Н.А. Подоплеловой

представляет собой
законченную научно
-
квалификационную работу

и

удовлетворяет требованиям,
установленным пунктами

9


14 «Положения о присуждении ученых степеней»,
утвержденного Постановлением Правительства РФ № 842 от 24 сентября 2013
года, с изменениями Постановления Правительства РФ № 335 от 21 апреля 2016
года,
в
редакции
Постановления

Правительства РФ № 748 от 02 августа 2016 года,
а ее автор заслуживает

присвоения искомой

ученой степени кандидата
биологических наук по специальности 03.01.02


биофизика
.

Соискатель имеет
16
научных работ,
все

по теме диссертации,
из них
7

статей,
опубликованных в рецензируемых российских и зарубежных научных
периодических изданиях, входящих в перечень В
АК
, и тезисы
9

докладов на
российских и
международных конференциях.

Наиболее значимые научные работы по теме диссертации:

1.

Podoplelova,

N.A
concentrated in their cap structures to promote clotting / Podopl
elova,
N.A.,

Sveshnikova, A.N
.,

Kotova, Y.N
.,

Eckly, A
.,

Receveur, N
.,

Nechipurenko,
4


D.Y
.,

Obydennyi, S.I
.,

Kireev, I.I
.,

Gachet, C
.,

Ataullakhanov, F.I
.,
Mangin,
P.H
.,

Panteleev, M.
A
. // Blood.



2016.


Vol. 128.


№ 13.


P. 1745
-
175
5

2.

Подоплелова Н.А. Регуляция мембранно
-
зависимых реакция свертывания
крови

/ Подоплелова Н.А., Котова Я.Н., Липец Е.Н., Атауллаханов Ф.И.,
Пантелеев М.
А. // Успехи физиологических наук.


2015.


Т. 46.



№4.



С. 3
-
14.

3.

Zakharova
-
associated activation and secretion
-
mediated
inhibition of coagulation factor XII. / Zakharova N.V., Artemenko E.O., Podoplelova
N.A., Sveshnikova A.N., Demina I.A., Ataullakhanov F.I., Panteleev M.A. // PLoS One


2015.


Vol.10.


№2,


P. e0116665

На автореферат поступило
4 положительных отзыва
:
1)

отзыв
д.б.н., профессора
Муриной Марины Алексеевны
, главного научного сотрудника лаборатории
физико
-
химических методов исследования и анализа Федерального
государственного бюджетно
го учреждения «Федеральный научно
-
клинический
центр физико
-
химической медицины Федерального медико
-
биологического
агенства» содержит замечание о том, что в автореферате имеются технические
погрешности, затрудняющие чтение, например, сокращение «ФХ» обознач
ает и
фосфатидилхолин, и фактор Х;
2)

отзыв д.м.н.
, профессор
а
Васильева Сергея
Александровича
, ведущего научного

сотрудник
а

НКО ХТ с ДС,

Федерального
государственного бюджетного учреждения

«Гем
атологический научный центр»
Министерства здравоохранения Рос
сийской Федерации

без замечаний;
3)

отзыв
к.
б
.н.
Животовой Веры Анатольевны
, научного сотрудника
группы разработки
новых методов выявления генетических полиморфизмов ФБУН «Центральный
научно
-
исследовательский институт Эпидемиологии» Федеральной службы по
надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
без
замечаний;
4)

отзыв к.б.н.
Д
а
шкевич Натальи Михайловны
, ведущего научного
сотрудника научного отдела ООО «Гемакор Лабс» без замечаний.

В отзывах отмечена актуальность и научная новизна диссертационной работы.
Сильной стороной данного исследования является широкий круг использованных
м
етодов. В работе рассмотрены как фундаментальные вопросы

мембранно
-
зависимых реакций свертывания крови, так и возможность
пра
ктического
5


применения полученных результатов; а
втор достаточно корректно использует
известные научные
биофизические и биохимические

методы
для
обо
снования
полученных результатов и

выводов
; опубликованные статьи достаточно полно
отражают содержание работы, а также положения и результаты, выносимые на
защиту. Приведенные в автореферате результаты и выводы обоснованы и
достоверны.

Выбор

официальных оппонентов и ведущей организации

обосновывается

тем
,
что оппоненты и сотрудники ведущей организации являются признанными
специалистами в областях науки, касающихся
биофизики, свертывания крови
,
мембранно
-
зависимых реакций
, имеют высоко цитируе
мые публикации в данных
сферах исследований,
и

способны о
ценить

научную и практическую
значимость

диссертации.

Оппонент


д.б.н., Холмухамедов Э.Л. является специалистом в
области биофизики мембранно
-
зависимых реакций. Оппонент


д.м.н., Литвинов
Р.И. имеет огромный опыт преподавательской и научно
-
практической работы и
является ведущим специалистом в
области свертывания

крови
.
Ведущая
организация


Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский
кардиологический научно
-
производственный комплекс» Министерства
здравоохранения Российской Федерации

является одним из ведущих институтов
,

в
котором

пров
одятся

фундаментал
ьны
е

и прикладны
е

научны
е

исследовани
я

в
области гематологии и свертывания

крови.

Диссертационный совет отмечает, что на основании выполн
енных соискателем
исследований:

разработана

м
етодология исследования взаимодействия

и пространственного
распределения
факторов свертывания с субпопуляциями активированных
тромбоцитов;

предложен
ы

оригинальн
ые

научн
ые

суждения
, согласно котор
ым

мультимеризация факторов
свертывания Х и Ха
при их связывании с
фосфолипидной мембраной препятствует их вымыванию из тромбоцитарног
о
тромба в услов
иях потока
, благодаря

тому, что

мультимеры
более п
лотно
связ
аны


с мембранами по сравнению
с мономер
ами
;


6


доказан
а

двухступенчатая диссоциация факторов

Х и Ха с мембраны
активированных тромбоцитов, обусловленная м
у
льтимеризацией
факторов
.

Теоретическая значимость

исследования обоснована тем, что:

доказаны

положения

о взаимодействии факторов плазменного звена с мембраной
тромбоцитов
, вносящие вкл
ад в
понимание механизмов
протекания

мембранно
-
зависимых реакций свертывания крови
;

применительно

к проблематике диссертации результативно (эффективно, то
есть с получением обладающих новизной результатов) использован

комплекс
существующих базовых методов исследования, таких как
проточная

цитометрия,
поверхностный плазмонный резонанс, а также конфокал
ьная и электронная
мик
роскопия
;

изложены

результаты
,
свидетельствующие

о различиях в механизме закрепления
на мембране факторов Х и Ха: для фактора

Х


закрепление на фосфолипидной
мембране происходит за счет его стабилизации, а для фактора


Ха

основную
роль
играет мультимеризация;

раскрыт
ы

механизмы
,

препятствующие вымыванию факторов свертывания из
тромбов в условиях потока
, которые включают

многостадийно
е

связывани
е

факторов свертывания с мембраной активированных тромбоцитов
,

неравномерном распределени
и

на ней,
образование области
повышен
ной

локальной концентрации факторов
, приводящей к

значительному, до 50 раз,
увеличению
скорости мембранных реакций
;

изучен
ы
процессы ассоциации и диссоциации

факторов Х и Ха
с
фосфолипидными везикулами и активированными

тромбоцитами
, измерены
константы

скорости этих реакций, определены
константы равновесия и
количество сайтов связывания;


Значение полученных соискателем результатов
исследования для практики
подтверждается тем, что:

разработаны
научные основы
взаимодействия факторов плазменного звена
свертывания с тромбоцитами в процессе росте тромба
;

7


определена

структура

участков
мембраны прокоагулянтных
тромбцитов
, в
которых концентрируются фак
торы свертывания и
которые характеризуются
большим количеством
складок мембран и органелл
;

представлены

результаты, которые могут быть использованы для создания
новых клинических методов диагностики нарушений свертывания крови.

Оценка достоверности

результатов выявила:

научные положения, выводы и результаты, сформули
рованные в диссертации,
обоснованы экспериментальными
данными
, достоверны и получили признание в
научной литературе и на различных конференциях
; экспериментальная работа
выполнена на высоком научном уровне
, результаты получены на
сертифицированном оборудов
ании

с применением современных
биофизических и
биохимических

методов исследования, стандартных методик обработки
результатов
;

калибровки обоснованы;
п
оказана воспроизводимость результатов
ис
следования в различных условиях;

теория

построена на известных, проверяемых данных по механизмам
взаимодействия белковых факторов свертывания с фосфолипидными клеточными
мембранами

и опубликованны
х

экспериментальны
х
данны
х

по теме диссертации;

идея базируется
на анализе литературных данных в об
ласти изучения
биофизических механизмов мембранно
-
зависимых

реакций свертывания крови;

использован
ы

авторски
е

данны
е

и данны
е
, полученны
е

ранее и опубликованны
е

в литературе
;

установлено
,
что полученные ав
тором результаты согласуются с ранее
опубликованными данными ведущих российских и
зарубежных специалистов и
не противоречат существующим представлениям о механизмах мембранно
-
зависимых реакций свертывания крови;

использованы

современные
методики сбора и об
работки информации
с
обоснованием выбора объект
а

и методов исследования.

Личный вклад

соискателя состоит в
анализе литературных данных,
планировании и проведении экспериментов, обработке и интерпретации
полученных данных, представлении результатов на российских и международных
конференциях, а также в подготовке научных публикаций по теме работы. Все


Приложенные файлы

  • pdf 26750840
    Размер файла: 552 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий